核酸提取是指將核酸（DNA和RNA）從細(xì)胞中提取出來(lái)的過(guò)程，總的來(lái)說(shuō)包括細(xì)胞裂解、核酸純化及后續(xù)核酸濃度、純度測(cè)定的步驟。根據(jù)原始樣品的種類(lèi)和核酸產(chǎn)物后續(xù)的各種應(yīng)用目的，細(xì)胞裂解和核酸純化步驟有不同的處理方法和要求。

實(shí)驗(yàn)室中的DNA提取：

案例一：小鼠基因型判定實(shí)驗(yàn)的模板DNA提取

初始樣品為小鼠尾切段?；蛐团卸▽?shí)驗(yàn)對(duì)DNA模板的濃度、純度要求不高，消化提取過(guò)程相對(duì)簡(jiǎn)單。

實(shí)驗(yàn)步驟：

1.將1cm尾巴切段置于1.5mL微量離心管中，加入適量裂解液（Lysis buffer）和蛋白酶（Proteinase K）于55~65℃水浴過(guò)夜消化。

2.充分消化后的尾巴樣品加入沉淀液（Precipitation buffer）后用旋渦混勻儀來(lái)使雜質(zhì)蛋白充分沉淀，雜質(zhì)沉淀后通過(guò)離心操作（如4℃，4000*g，5min），取出溶有目標(biāo)DNA的上清液，丟棄雜質(zhì)沉淀。

3.上清液中加入100%異丙醇，小心顛倒離心管30~40次，便可以將產(chǎn)物DNA沉降。離心操作（4℃，10000*g或12000rpm，10min）去除上清。

4.用75%乙醇洗滌兩次DNA產(chǎn)物，待乙醇充分揮發(fā)后，用水或TE緩沖液（Tris-EDTA buffer）收獲DNA模板產(chǎn)物。

進(jìn)行后續(xù)的PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)前，可以使用Nanodrop儀器來(lái)進(jìn)行DNA濃度和純度的測(cè)定來(lái)提高PCR反應(yīng)的成功率。在PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)不順利的情況下，也可以進(jìn)一步對(duì)DNA產(chǎn)品的完整度進(jìn)行檢測(cè)，具體方法可以參考核酸檢測(cè)和核酸擴(kuò)增的有關(guān)內(nèi)容。

實(shí)驗(yàn)中用到的愛(ài)必勝試劑、耗材和儀器：

試劑：裂解液、蛋白酶、沉淀液、異丙醇、乙醇、TE緩沖液

耗材：槍頭、1.5ml微量離心管、（15、50mL）離心管

儀器：旋渦混勻儀、分光光度儀