胎牛血清是從胎牛臍靜脈或心臟采集的血液經(jīng)離心、過(guò)濾、滅菌等處理后得到的一種液態(tài)制品。胎牛血清通常分為胎兒血清和新生牛犢血清兩種，其中胎兒血清是指從胎牛臍靜脈采集的血液，而新生牛犢血清則是指從出生后7天內(nèi)采集的血液。本文將對(duì)胎牛血清的用途、主要成分、功能、制作方法、儲(chǔ)存方式、溶解方式、使用注意事項(xiàng)等進(jìn)行詳細(xì)全面的闡述。

一、用途

胎牛血清是一種重要的細(xì)胞培養(yǎng)基添加劑，可以提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、生長(zhǎng)因子和激素等，促進(jìn)細(xì)胞增殖和分化。此外，胎牛血清還廣泛應(yīng)用于疫苗制備、生物制品生產(chǎn)、藥物篩選等領(lǐng)域。

二、主要成分

胎牛血清主要由水、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、糖類(lèi)、無(wú)機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子等組成。其中，蛋白質(zhì)是胎牛血清的主要成分，占總質(zhì)量的60%~80%。此外，胎牛血清中還含有多種生長(zhǎng)因子，如胰島素樣生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子等，這些生長(zhǎng)因子對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和分化具有重要的作用。

三、功能

胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份，常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。

1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物，以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。

2.增加細(xì)胞對(duì)病毒和細(xì)菌的抵抗力，促進(jìn)細(xì)胞代謝和免疫功能的提高。

3.提供結(jié)合蛋白，能識(shí)別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。

4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。

5.提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受傷害。

6.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。

7.起酸堿度緩沖液作用。

四、制作方法

胎牛血清的制作方法通常包括采集、處理、檢測(cè)和包裝等步驟。具體步驟如下：

1. 采集：胎牛心臟穿刺取血

2. 處理：預(yù)過(guò)濾血清、精過(guò)濾血清，三次0.1um過(guò)濾，避免病原微生物的污染

3. 檢測(cè)：進(jìn)行多項(xiàng)的質(zhì)量控制檢測(cè)，以及全面的理化、微生物檢測(cè)，同時(shí)進(jìn)行特定的細(xì)胞生長(zhǎng)以及病毒檢測(cè)。

4. 包裝：將檢測(cè)后的胎牛血清進(jìn)行分裝和包裝，以便于存儲(chǔ)和使用。

五、儲(chǔ)存方式

建議胎牛血清到貨后，先檢查血清有無(wú)異常后及時(shí)放進(jìn)冰箱，在-18~-20℃條件下進(jìn)行儲(chǔ)存。血清不宜4℃甚至更高溫度長(zhǎng)期保存，切忌反復(fù)凍融，少量使用時(shí)建議分裝凍存。(整個(gè)操作需在無(wú)菌操作臺(tái)中進(jìn)行，注意無(wú)菌操作。）血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%，因此在分裝血清時(shí)須預(yù)留一定體積，否則易導(dǎo)致分裝瓶?jī)隽讯l(fā)生污染。

六、溶解方式

建議使用血清梯度融化方法，以500ml裝血清為例：

第一步：將血清從-20℃冰箱中取出后放置在室溫90min或者15℃水浴18min

第二步：將血清放置在20℃水浴中融化25min

第三步：將血清放置在37℃水浴中融化35min

此類(lèi)融化方法可以保證血清中各類(lèi)因子的活性并且極大減少沉淀的產(chǎn)生。

1. 胎牛血清應(yīng)存放在低溫環(huán)境中，避免受到陽(yáng)光直射和高溫的影響。

2. 在使用前，應(yīng)先將胎牛血清緩慢解凍，并在4℃下保存，避免多次凍融。

3. 在使用胎牛血清時(shí)，應(yīng)注意其批次和來(lái)源，以保證其質(zhì)量和穩(wěn)定性。

4. 在使用胎牛血清時(shí)，應(yīng)注意其濃度和添加量，以避免對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和分化產(chǎn)生不良影響。

5. 在使用胎牛血清時(shí)，應(yīng)注意其可能存在的病毒和細(xì)菌等污染物，以避免對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)和生產(chǎn)產(chǎn)生不良影響。

綜上所述，胎牛血清是一種重要的細(xì)胞培養(yǎng)基添加劑，具有促進(jìn)細(xì)胞增殖和分化、提高免疫功能等多種功能。在使用胎牛血清時(shí)，應(yīng)注意其儲(chǔ)存方式、溶解方式和使用注意事項(xiàng)，以保證其質(zhì)量和穩(wěn)定性。